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ECL/ECL Prime/ECL Selectを使ったウェスタンブロッティングの結果およびご感想

ECL prime

投稿者 shin
投稿者所属 大学 准教授
投稿日 2011年01月11日
今回お使いいただいた試薬
ECL Prime
サンプル由来
細胞株
サンプル調製方法
RIPAバッファーにて細胞を溶解した後、SDS-PAGE並びにウエスタンブロッティングを行った。
1ウェルあたりのサンプルアプライ量(µg)
15
1ウェルあたりに含まれる目的タンパク質の量(ng)(推定)
10000
目的タンパク質の名前
DD tag protein
検出結果 & 検出条件 検出手段
CCDイメージャー
使用した製品名(CCDイメージャーの場合)
RAS4000
検出画像へのコメント
検出画像1:
検出画像2:
検出画像3:
露出時間
検出画像1:
検出画像2:
検出画像3:
一次抗体
anti-DD tag
一次抗体の希釈倍率(1:X)
1000
二次抗体
anti-mouse IgG
二次抗体の希釈倍率(1:X)
2000
普段主にお使いの検出試薬
ECL Plus
ECL/ECL Prime/ECL Selectをお使いいただいた際に変更した条件
変更していない
ECL/ECL Prime/ECL Selectをお使いいただいた感想など
かなり感度が良くなりました。nonspecificなシグナルも少なかったようです。

 

投稿者 GEヘルスケア
投稿者所属 サポートスタッフ
投稿日 2011年02月09日

ご投稿頂きありがとうございます。(GEヘルスケア)

「かなり感度が良くなりnonspecificなシグナルも少ないようだった」とのこと、ご期待に添う結果でしたら幸いです。
ECL PrimeはECL Plusと比較して感度が2~4倍程度であること、検出反応1時間後でも約60%のシグナル強度が持続することにより、サンプルによっては一次抗体、二次抗体濃度をともに2倍程度薄くしても、従来どおりの露出時間でシグナル強度を維持できます。抗体やサンプルを節約したい際などに、ぜひご検討ください。
ECLシリーズに限らずウェスタンブロッティングでお困りのことがあれば、お気軽にお問合せください。

投稿者 GEヘルスケア担当 H
投稿者所属 GEスタッフ
投稿日 2011年02月03日

お待たせして大変申し訳ございません (GEヘルスケア)

ECL Primeの製品評価および実験結果の公開に格別のご協力をいただき、誠にありがとうございます。
お忙しい中、ご協力をいただいたにも関わらず、長い間お待たせすることとなり大変申し訳ございません。
予想を超える反響に十分な体制を準備できていませんでしたことが、このようにお待たせする原因となりました。
現在テクニカルスタッフの体制を増強して個別に回答・ご提案を準備中です。
(2月10日より順次、回答・ご提案を掲載予定です。)

どうかこれからも、GEヘルスケア・ジャパンをよろしくお願いします。